| Abstract | CILJ ISTRAŽIVANJA
Cilj istraživanja u okviru ovog specijalističkog rada bio je razviti i validirati analitičke metode za
određivanje ostataka djelatnih tvari 6-markaptopurin i valganciklovir hidroklorid na površinama od
različitih materijala. Upotrebom razvijenih i validiranih, analitičnih metoda i korištenjem definiranih
postupaka čišćenja proizvodne opreme, proizvodnih, ali i neproizvodnih prostorija te
vanjskih/nekontaktnih dijelova opreme i uređaja provesti dekontaminaciju pogona za proizvodnju
citotoksičnih lijekova te dokumentirano dokazati da su kontaminanti 6-merkaptopurin i valganciklovir
hidroklorid uklonjeni ispod propisanog kriterija prihvatljivosti s obuhvaćenih površina. Uspješno
završen postupak čišćenja jamstvo je sigurne prenamjene prostorija, opreme i uređaja u druge
proizvodne svrhe.
MATERIJALI I METODE
Citotoksični lijekovi zaustavljaju proliferaciju stanica u određenom ciklusu njihova rasta. Primjenjuju
se u borbi protiv brzo rastućih stanica poput stanica karcinoma, ali i kod autoimunih oboljenja poput
različitih vrsta artritisa. Citotoksični lijekovi su visoko potentne tvari koje zahtijevaju posebne
postupke tijekom proizvodnje te preventivne mjere tijekom profesionalne izloženosti. Također, visok
stupanj opreza zahtjeva i provedba redovnih postupaka čišćenja proizvodne opreme i prostora, a
posebice u slučaju prenamjene istih u druge proizvodne svrhe.
Razvoj i validacija dviju HPLC metoda za određivanje ostataka 6-merkaptopurina i valganciklovir
hidroklorida na površinama nakon čišćenja u proizvodnom pogonu SOO2B, Pliva Hrvatska d.o.o.
provedena je u skladu s internim protokolima i ICH smjernicama. Validacijom HPLC metoda za
analizu 6-merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida ispitivana je njihova selektivnost, linearnost,
točnost, stabilnost otopina i prikupljenih uzoraka briseva te odgovarajući limiti detekcije i
kvantifikacije.
Određene su najkritičnije lokacije na kojima je proveden postupak uzorkovanja po završetku postupka
čišćenja uključujući proizvodnu opremu, proizvodne i neproizvodne prostorije te vanjske/nekontaktne
dijelove uređaja. Svako mjesto uzorkovanja označeno je jedinstvenom oznakom za daljnje praćenje i
evaluaciju tijekom postupka.
U sklopu provedbe postupka dekontaminacije iz proizvodnog pogona je uklonjena sva
jednonamjenska i teško čistljiva oprema, pomoćni pribor i pomagala. Navedena oprema izuzeta je iz
postupka uzorkovanja u svrhu praćenja dekontaminacije zbog prethodno navedenih karakteristika te
velikog stupnja rizika od unakrsne kontaminacije. Na ostaloj demontiranoj, proizvodnoj opremi,
uređajima i pomoćnim sredstvima provedeno je više uzastopnih ciklusa čišćenja proizvodnog pogona i
sve opreme te uzorkovanje i analiza uzoraka prikupljenih briseva s definiranih, reprezentativnih
lokacija nakon svakog provedenog dekontaminacijskog čišćenja. Uzastopno čišćenje i uzorkovanje
provodilo se sve do postizanja definiranih kriterija prihvatljivosti, odnosno vrijednosti rezultata analiza
manjih ili jednakih limitu detekcije validiranih HPLC metoda za analizu 6-merkaptopurina i
valganciklovir hidroklorida.
Nakon postizanja definiranih kriterija prihvatljivosti za sve definirane stavke u postupku čišćenja
pristupilo se završnoj fazi dekontaminacije koja je uključivala demontažu filtera proizvodnih
prostorija. Potom je provedeno završno čišćenje i uzorkovanje lokacija skidanja filtera s ciljem
konačne provjere stanja kontaminacije ostacima 6-merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida.
RASPRAVA
Validacijom HPLC metoda za analizu 6-merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida ispitana je i
dokazana je njihova selektivnost, linearnost, točnost, stabilnost otopina i prikupljenih uzoraka briseva
te odgovarajući limiti detekcije i kvantifikacije.
Provedena je evaluacija dobivenih rezultata analiza uzoraka HPLC metodama za određivanje 6-
merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida te donijet konačan zaključak o uspješnosti provedbe
postupaka čišćenja proizvodnog pogona citotoksičnih lijekova.
Postupak čišćenja proizvodnog pogona nakon proizvodnje citotoksičnih proizvoda predstavljao je
projekt koji zahtjeva opsežan, precizan i savjestan rad, detaljistički pristup, analitičko i proizvodno
iskustvo, inženjerski pristup, poznavanje kemijskih svojstava analiziranih spojeva i potencijalnih
interakcija, a predstavljao je nesvakidašnji te vrlo specifičan farmaceutsko-inženjerski izazov.
ZAKLJUČAK
Validacija čišćenja proizvodnog pogona nakon proizvodnje farmaceutskih oblika s citotoksičnim
djelatnim tvarima (dekontaminacijski postupak) provedena je uzastopnim čišćenjem svih obuhvaćenih
prostorija i vanjskih/nekontaktnih površina uređaja te njihovim uzorkovanjem sve do postizanja
analitičkih rezultata manjih ili jednakih limitima detekcije validiranih analitičkih metoda za
određivanje 6-merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida.
Na osnovu svih dobivenih rezultata, proizvodne, neproizvodne prostorije i vanjske/nekontaktne
površine uređaja u pogonu SOO2B smatraju se uspješno dekontaminirane od ostataka kontaminanata
6-merkaptopurina i valganciklovir hidroklorida. Provedena validacija čišćenja pogona, kao i sam
dekontaminacijski postupak, smatraju se uspješno završenim te je moguća sigurna prenamjena svih
prostorija i uređaja u druge proizvodne svrhe. |
| Abstract (english) | AIM OF THE PAPER
The aim of the research was to develop and validate analytical methods for determining the residues of
the active substances 6-marcaptopurine and valganciclovir hydrochloride on surfaces made of different
materials. Onwards, using developed and validated analytical methods and using defined procedures
for cleaning production equipment, production and non-production rooms and external/non-contact
parts of equipment and devices, carry out decontamination process of the pharmaceutical plant for the
production of cytotoxic drugs and document that the contaminants 6-mercaptopurine and
valganciclovir hydrochloride have been removed below prescribed acceptance limits. A successfully
completed decontamination procedure is a guarantee of safe repurposing of rooms, equipment and
devices for other production purposes.
MATERIALS AND METHODS
Cytotoxic drugs stop the proliferation of cells in a certain cycle of their growth. They are used in the
fight against rapidly growing cells such as cancer cells, but also in autoimmune diseases such as
different types of arthritis. Cytotoxic drugs are highly potent substances that require special procedures
during production and preventive measures during occupational exposure. Also, a high degree of
caution is required while implementing the regular procedures for production equipment and premises
cleaning, especially in the case of their repurposing for other production activities.
Development and validation of two HPLC methods for the determination of 6-mercaptopurine and
valganciclovir hydrochloride residues on surfaces after cleaning in the production plant SOO2B, Pliva
Croatia d.o.o. was performed in accordance with internal protocols and ICH guidelines. Validation
procedure of HPLC methods for the analysis of 6-mercaptopurine and valganciclovir hydrochloride
tested their selectivity, linearity, accuracy, stability of solutions and swab samples and finally, their
detection and quantification limits.
The most critical locations were determined where the sampling procedures were carried out after the
performed cleaning, including production equipment, production and non-production rooms, and
external/non-contact parts of the devices. Each sampling location was assigned a unique code for
further monitoring and evaluation during the procedure.
As part of the decontamination process, all single-purpose and difficult-to-clean equipment,
accessories and auxiliary equipment were removed from the production plant. The mentioned
equipment is excluded from the sampling procedure due to the aforementioned characteristics and the
high degree of cross-contamination risk. On the rest of the dismantled production equipment, devices
and auxiliary equipment, several consecutive cycles of cleaning were carried out, as well as sampling
and analysis of swab samples collected from defined, representative locations after each performed
decontamination cleaning. Consecutive cleaning and sampling were carried out until the defined
acceptance limits were achieved, i.e. the values of the analysis results lower than or equal to the
detection limit of the validated HPLC methods for the analysis of 6-mercaptopurine and valganciclovir
hydrochloride.
After achieving the defined acceptance limits for all defined items in the cleaning process, the final
phase of decontamination was performed, which included dismantling the filters of the production
premises. After that, final cleaning and sampling of filter removal locations was carried out with the
aim to verify the final state of contamination.
DISSCUSSION
Validation procedure of HPLC methods for the analysis of 6-mercaptopurine and valganciclovir
hydrochloride tested and proved their selectivity, linearity, accuracy, stability of solutions and swab
samples, detection and quantification limits.
An evaluation of the obtained results of the samples analysis using HPLC methods for the
determination of 6-mercaptopurine and valganciclovir hydrochloride was performed and final
conclusion on the success of the cleaning procedures of the cytotoxic drugs production plant was
made.
The process of cleaning the plant after the production of cytotoxic products was a project that required
extensive, precise and conscientious work, a detailed approach, analytical and production experience,
an engineering approach, knowledge of the chemical properties of the analysed compounds and
potential interactions and it represented an unusual and very specific pharmaceutical-engineering
challenge.
CONCLUSION
Cleaning validation of the plant after the production of pharmaceutical forms with cytotoxic active
substances (decontamination procedure) was carried out by successive cleaning of all production and
non-production rooms and external/non-contact surfaces of the devices and their sampling until
achieving analytical results lower than or equal to the detection limits of validated analytical methods
for the determination of 6-mercaptopurine and valganciclovir hydrochloride.
Based on all the obtained results, the production, non-production rooms and external/non-contact
surfaces of the devices in the SOO2B plant are considered to be successfully decontaminated from the
residues of 6-mercaptopurine and valganciclovir hydrochloride contaminants. The performed cleaning
validation as well as the decontamination procedure itself are considered to be successfully completed,
and, therefore, safe repurposing of all rooms and devices for other production purposes is possible. |
