Izolacija egzosoma iz kulture stanica raka dojke MDA-MB-2B1

diplomski rad

• Naslov (engleski): Isolation of exosomes from MDA-MB-2B1 breast cancer culture
• Autor: Lucija Kovač
• Mentor: Karmela Barišić (mentor)
• Član povjerenstva: Karmela Barišić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Lidija Bach-Rojecky (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Jozsef Petrik (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Farmaceutsko-biokemijski fakultet; (Zavod za medicinsku biokemiju i hematologiju); Zagreb
• Datum i država obrane: 2019-07-11, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Farmacija; Farmacija

Sažetak

Egzosomi su izvanstanične mikrovezikule koje izlučuju gotovo sve stanice u
organizmu. Mogu se pronaći u većini tjelesnih tekućina kao što su urin, krv, slina, cerebralna
tekućina i majčino mlijeko. Njihov sadržaj usko korelira sa sadržajem stanice iz koje potječu,
a s obzirom da ih između ostalog izlučuju i stanice nastale patološkim procesima, odnosno
tumorske stanice, njihova izolacija i daljnje promatranje igra veliku ulogu u ranoj dijagnostici
tumorskih bolesti. Cilj ovog diplomskog rada bio je usporediti dvije metode izolacije i doći do
zaključka koja je od njih prikladnija za izolaciju egzosoma. Prva metoda je bila metoda
centrifugiranja u kojoj se izolacija egzosoma temelji na njihovoj precipitaciji pri jačim
snagama centrifugalnog polja. Nadalje, korištena je metoda koja za poboljšanju precipitaciju
egzosoma koristi komercijalno dostupan precipitacijski polimer. Nakon analize uzoraka na
Zeta-sizeru može se zaključit da je metoda s precipitacijskim polimerom uspješnija u izolaciji
egzosoma. Također, analizirani su i uvjeti skladištenja. Iz rezultata analize zaključeno je da
uzorak izoliranih egzosoma treba biti svježe pripravljen prije daljnje analize veličine čestica.

Sažetak (engleski)

Exosomes are extracellular microvesicules which are produced by almost every cell in human
organism. They can be found in most body fluids such as urine, blood, saliva, celebral fluid and
breast milk. Exosome content closely correlates with the content of the cell they originate from,
and as they are also produced by tumour cells, their isolation and further examination is greatly
important in early diagnosis of tumour illnesses. The goal of this research was to compare two
methods of exosome isolation and conclude which one of them is more suitable to be used for
isolation of exosomes. First method used was the method of centrifugation in which the isolation
of exosomes is based on their precipitation by centrifuge forces. Furthermore, other method used
commercially available kit, which contains special polimer for exosome precipitation. After
sample analysis on Zeta-sizer it could be concluded that the method using TEI reagent is much
more successful in exosome isolation. The storage conditions were also analysed. From the results
oft he analyses it is concluded that the exosomes should be analysed freshly after isolation in order
to get optimal results.

• Ključne riječi: egzosomi; izolacija; centrifuga; precipitacijski polimer
• Ključne riječi (engleski): exosomes; isolation; centrifuge; precipitation polimer
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:163:751171
• Studijski program: Naziv: Farmacija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra farmacije (mag. pharm.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2020-02-18 16:30:02