Identifikacija i određivanje sadržaja biotina u tabletama primjenom vezanog sustava tekućinske kromatografije i masene spektrometrije

diplomski rad

• Naslov (engleski): Identification and determination of biotin content in tablets using liquid chromatography coupled with mass spectrometry
• Autor: Barbara Matelić
• Mentor: Miranda Sertić (mentor)
• Član povjerenstva: Miranda Sertić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ana Mornar Turk (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Dubravka Vitali Čepo (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Farmaceutsko-biokemijski fakultet; (Zavod za analitiku i kontrolu lijekova); Zagreb
• Datum i država obrane: 2019-09-30, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Farmacija; Farmacija

Sažetak

Vitamini su esencijalni nutrijenti za ljudski organizam i sudjeluju u mnogim fiziološkim procesima te doprinose zdravlju, ali i izgledu. Postoje vitamini koji su topljivi u mastima i vitamini topljivi u vodi. Ovaj rad se temelji na vitaminima topljivim u vodi jer je biotin dio vitamina B-kompleksa topljivih u vodi.
Zbog nemogućnosti unosa preporučene dnevne doze vitamina hranom, i potencijalnog rješavanja zdravstvenih tegoba, ljudi sve više posežu za dodacima prehrani. Tržište je bogato multivitaminskim pripravcima koji ne podliježu strogoj kontroli kvalitete, a mnogi od njih sadrže količinu suplemenata manju od deklarirane.
Cilj ovog rada je potvrditi prisutnost biotina u monovitaminskom pripravku masenom spektrometrijom, optimizirati uvjete kromatografske analize za njegovu analizu te odrediti sadržaj biotina u vitaminskom pripravku. Za analizu je korišten vezani sustav tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti, elektrosprej ionizatora i masene spektrometrije (HPLC-ESI-MS/MS).
Najprije je odabran udio i brzina protoka mobilne faze. Primjenjena je izokratna eluacija s mobilnom fazom sastava voda:metanol:mravlja kiselina = 70:30:0,1 (v/v/v), pri brzini protoka od 0.8 ml/min. Zatim je provedena fragmentacija i MSn analiza uz pomoć masenog spektrometra, što je rezultiralo utvrđivanjem karakterističnih fragmenata i strukturnom identifikacijom biotina u uzorku.
Za analizu nije bila dostupna kemijska poredbena tvar te se kao referentna supstanca koristio drugi uzorak monovitaminskog dodatka. Ista referentna supstanca se koristila i za kvantitativnu analizu. Dobiveni rezultati potvrđuju da se u analiziranom vitaminskom preparatu, kupljenom internet kupovinom, nalazi biotin i da je prisutan u količini od 8,4 mg što približno odgovara deklariranom sadržaju od 10 mg.

Sažetak (engleski)

Vitamins are the essential nutrients in the human organism involved in many physiological processes, contributing to both, the health and the good look. There are water-soluble and fat-soluble vitamins. This thesis is based on water-soluble vitamins since biotin is part of vitamin B complex which are water-soluble.
Due to the inability of the intake of recommended dietary allowance of vitamins via food, and the potential of resolving the health issues, people are increasingly reaching out for the food supplements. There are multivitamin preparations on the market that are not subject to strict quality control, many of which containing less than the declared amount of supplements.
The aim of this study is to confirm the presence of the biotin in the monovitamin food supplement by mass spectrometry, to optimize the conditions of its chromatographic analysis and to determine the biotin content in vitamin preparation. Liquid chromatography coupled with electrospray ionization and mass spectrometer (HPLC-ESI-MS/MS) was used for analysis.
The content and mobile phase flow rate were selected first. Isocratic elution with mobile phase consisting of water:methanol:formic acid = 70:30:0.1 (v/v/v), at the flow rate of 0.8 ml/min was used followed by the fragmentation and MSn analysis, resulting in the identification of the characteristic fragments and the structural identification of biotin in the sample.
No chemical reference standard of biotin was available, hence another monovitamin food supplement was used as reference substance. The same reference substance was also used for quantification. The results show that biotin is present in the analysed vitamin food supplement, which were purchased through internet shopping. The defined amount of biotin in the sample is 8.4 mg that approximately corresponds to the sample declaration of 10 mg of biotin.

• Ključne riječi: biotin; vitamini; HPLC/DAD/MS
• Ključne riječi (engleski): biotin; vitamins; HPLC/DAD/MS
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:163:882342
• Studijski program: Naziv: Farmacija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra farmacije (mag. pharm.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2020-03-04 16:09:45