Arilesterazna aktivnost paraoksonaze 1 u uzorku seruma, EDTA, citratne i heparinske plazme

diplomski rad

• Naslov (engleski): Arylesterase activity of paraoxonase 1 in serum, EDTA, citrate and heparin plasma
• Autor: Ana Franjko
• Mentor: Marija Grdić Rajković (mentor)
• Član povjerenstva: Marija Grdić Rajković
• Član povjerenstva: Roberta Petlevski
• Član povjerenstva: Lovorka Vujić
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Farmaceutsko-biokemijski fakultet; (Zavod za medicinsku biokemiju i hematologiju); Zagreb
• Datum i država obrane: 2015-07-13, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Farmacija; Farmacija

Sažetak

Humana serumska paraoksonaza 1 (PON1) je kalcij ovisan enzim koji se sintetizira u jetri, a u krvi je vezan za lipoproteine visoke gustoće (HDL). PON1 posjeduje organofosfataznu, arilesteraznu i laktonaznu aktivnost i hidrolizira različite vrste supstrata. Zbog antiaterogenog i antioksidacijskog djelovanja sve se više istražuje u kliničkim i epidemiološkim ispitivanjima. Arilesterazna aktivnost PON1 (ARE) određuje se pomoću supstrata fenilacetata i to najčešće iz uzorka seruma. Cilj ispitivanja bio je odrediti može li neki drugi uzorak osim seruma biti prikladan za određivanje ARE. Pritom su korišteni uzorci plazme s antikoagulansima: EDTA, citrat i heparin. Ispitivanje je pokazalo da uzorak EDTA plazme nije dobar za određivanje ARE jer EDTA veže kalcij koji je važan za aktivnost PON1. U uzorku citratne plazme enzimska aktivnost PON1 je snižena u odnosu na serum, ali ne statistički značajno te se takav uzorak može koristiti za određivanje ARE. Najpouzdaniji je osim seruma uzorak u kojem se koristi heparin kao antikoagulans jer daje najmanja odstupanja vrijednosti enzimske aktivnosti PON1 prema serumu. Iako je PON1 stabilna do 6 mjeseci pohranjivanjem uzorka na -20˚C, utvrđeno je da skladištenjem uzorka seruma, EDTA, citratne i heparinske plazme na +4˚C vrijednosti enzimske aktivnosti PON1 variraju. Pritom se aktivnost PON1 peti dan od uzimanja uzorka u EDTA plazmi smanji za više od 90%, a u uzorku seruma, citratne i heparinske plazme za 10% u odnosu na aktivnost PON1 prvog dana. Time je potvrđeno da je enzimsku aktivnosti PON1 najbolje izmjeriti neposredno nakon uzimanja uzorka.

Sažetak (engleski)

Human serum paraoxonase 1 (PON1) is an Ca-dependant enzyme that is synthesised in liver and in blood is mainly associated with a high density lipoprotein (HDL). PON1 has organophosphatasa, arylesterase and lactonase activity and it hydrolyzes many different substrates. Because of its antiatherogenic function and antioxidant activity there is an increasing interest in clinical and epidemiological studies. Arylesterase activity of PON1 (ARE) is determined by using the substrate phenylacetate, mostly from serum samples. The aim of the study was to determine if a second sample except serum can be suitable for determining the ARE. The plasma samples were used with anticoagulants: EDTA, citrate and heparin. The study showed that a sample of EDTA plasma is not good for determining ARE because EDTA binds calcium, which is important for PON1 activity. In a sample of citrated plasma PON1 enzymatic activity is reduced as compared to the serum, but not statistically significant, and such a sample can be used to determine the ARE. The most reliable sample other than serum, is one with heparin as an anticoagulant because it gives the minimum deviation value of the enzymatic activity PON1 as compared to the serum. Although PON1 is stable up to 6 months by storing the sample at -20 °C, it was found that storage of the sample serum, EDTA, citrate and heparin plasma at + 4 °C PON1 enzyme activity values vary. The activity of the PON1 fifth day in the EDTA plasma sample is reduced by more than 90%, and in a sample of serum, citrated and heparin plasma by 10% in relation to the first day. The results of the investigation show that the enzymatic activity of PON1 is preferably measured immediately after the sampling.

• Ključne riječi: paraoksonaza 1; arilesterazna aktivnost (ARE); serum; plazma; antikoagulansi
• Ključne riječi (engleski): paraoxonase 1; arylesterase acivity (ARE); serum; plasma; anticoagulants
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:163:754544
• Studijski program: Naziv: Farmacija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra farmacije (mag. pharm.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Pristup korisnicima matične ustanove
• Datum i vrijeme pohrane: 2016-01-20 14:15:35