Utvrđivanje spolnih i starosnih razlika u ekspresiji obje podjedinice feritina imunokemijskim metodama nove generacije

diplomski rad

• Naslov (engleski): Determination of sex and age differences in expression of both ferritin subunits by the new generation immunochemical methods
• Autor: Nikolina Antolić
• Mentor: Petra Turčić (mentor)
• Mentor: Marija Ljubojević (mentor)
• Član povjerenstva: Petra Turčić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Živka Juričić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Marija Ljubojević (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Farmaceutsko-biokemijski fakultet; (Zavod za farmakologiju); Zagreb
• Datum i država obrane: 2019-05-30, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Farmacija; Farmacija

Sažetak

Kompleksna fiziologija metabolizma željeza ima dugu povijest istraživanja, od feritinskog kompleksa koji spada među
najstarije izolirane proteine, do u posljednjih dvadesetak godina nadogradnje u cjelovitu sliku s mnoštvom sudionika
čija je uloga još uvijek nedovoljno istražena. Premda feritinski kompleks ulazi u međudjelovanja sa svim prijelaznim
metalima, skladištenje željeza u stanici smatra se njegovom glavnom ulogom. Željezo, iako je esencijalni element
mora se vrlo precizno kontrolirati kako oslobođeno ne bi izazvalo nastanak reaktivnih kisikovih radikala (engl.
reactive oxigen species, ROS). Feritinski kompleks od 24 podjedinice u obliku nanokaveza, odnosno proteinske kugle,
i proteini koji su s njim u međudjelovanju od iznimne su važnosti u fiziološkim procesima stanica koje koriste željezo.
Vrlo ranim istraživanjima na eksperimentalnim životinjama utvrđene su spolne razlike u količini željeza u jetri i
bubrezima u korist ženki, da bi se naknadno povezale sa spolnim razlikama u količini feritina u navedenim organima.
Pri tome jetra, odnosno hepatociti, imaju glavnu ulogu u skladištenju željeza u organizmu, dok bubrezi sudjeluju u
njegovoj reciklaži. Primjenom imunokemijskih metoda nove generacije u ovom radu praćene su spolne i starosne
razlike u ekspresiji lake i teške podjedinice feritina u jetri tromjesečnih i dvogodišnjih eksperimentalnih životinja.
Imunohistokemijski je dobiven uvid u detaljnu raspodjelu feritinskih podjedinica unutar navedenog organa, dok
western analizom utvrđene razlike u ekspresiji pojedinih podjedinica. Rezultati imunokemijskih metoda potvrđuju da
postoje spolne razlike u obje feritinske podjedinice te da starenjem razlike ostaju prisutne, dok se količina feritina u
oba navedena organa povećava ukazujući na povećanu količinu željeza u njima. Obje podjedinice feritina pokazuju
vrlo sličnu raspodjelu u jetri koja je najizraženija u hepatocitima oko centralne vene. Zaključeno je da se u jetri
eksprimiraju obje podjedinice feritina te uz spolne pokazuju i starosne razlike koje bi mogle biti u korelaciji s
povećanom količinom željeza te time s oksidativnim stresom ključnim u patofiziološkim mehanizmima procesa
starenja.

Sažetak (engleski)

The complex physiology of iron metabolism has a long history of research, from the ferritin complex, which is among
the oldest isolated proteins, to the last twenty years of upgrading to a complete picture with many participants whose
role has still not been researched enough. Although ferritin complex interacts with all transition metals, its main purpose
is to store iron in a cell. Iron, although the essential element, has to be precisely controlled so that the released does not
cause the formation of reactive oxygen radicals (reactive oxygen species, ROS). Ferritin complex consists of 24
subunits forming a nanocage, i.e. protein sphere, and proteins which interact with it are of exceptional value in
physiological processes of the cells using iron. Very early research on experimental animals found gender differences in
the amount of iron in the liver and kidneys in favor of females, which was later associated to gender differences in the
amount of ferritin in these organs. In this case, liver, i.e. hepatocytes, play a major role in storing iron in an organism,
while kidneys are involved in its recycling. By using the new generation immunochemical methods in this work, sex
and age differences in the expression of light and heavy subunits of ferritin in the liver of three months old and two
years old experimental animals were followed. Detailed distribution of ferritin subunits inside the organ is obtained by
immunohistochemistry, while differences in the expression of individual subunits are determined by western analysis.
The results of immunochemical methods confirm that there are sex differences in both ferritin subunits and that age
differences remain, while the amount of ferritin in both organs increases by indicating an increased amount of iron in
them. Both ferritin subunits show a very similar distribution in the liver which is most pronounced in hepatocytes
around the central vein. It is concluded that both ferritin subunits are expressed in the liver and show both sex and age
differences which may be correlated with an increased amount of iron and thus with oxidative stress, which is crucial to
the pathophysiological mechanisms of the aging process.

• Ključne riječi: feritin; hepatociti; imunokemijske metode; spol; starenje; oksidativni stres
• Ključne riječi (engleski): ferritin; hepatocytes; immunochemical method; seks; ageing; oxidative stress
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:163:588930
• Studijski program: Naziv: Farmacija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra farmacije (mag. pharm.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2020-02-18 16:14:51